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arcticzymes 80400-100說明書

更新時間：2019-03-22 點擊次數：2046

arcticzymes 80400-100說明書

PCR Decontamination Kit

PCR去污試劑盒

規格	貨號	價格
Pack size: 100 rxn	#80400-100	€94
Pack size: 500 rxn	#80400-500	€455

PCR去污試劑盒可去除PCR預混液中的污染DNA，而不會降低PCR靈敏度。

dsDNase的雙鏈特異性允許用引物和探針進行凈化。
有效用于終點PCR和基于探針的qPCR。
污染細菌DNA降至檢測限以下。
快速簡便的協議。

在不降低靈敏度的情況下對主混合物進行凈化一直是一個挑戰。特別是當靶向少量DNA時，污染DNA是一個主要問題。由去污方案引起的qPCR測定中的任何靈敏度損失都是不可接受的。

套件內容：

DTT（滅活援助）
dsDNase

協議

PCR去污試劑盒方案

圖1：PCR去污試劑盒方案

將引物和探針與主混合物和試劑盒內容混合
在37?C孵育20分鐘
在60?C下滅活20分鐘
添加模板并運行qPCR

在DTT存在下，dsDNase在60℃時不可逆地失活，確保滅活后添加的任何模板都能安全地消化。

從20μl反應中去除污染DNA的方案，但可以通過調整試劑盒內容物的體積來放大或縮小。

500 pg untreated50 pg untreated5 pg untreated500 fg untreated50 fg untreatedNTC untreated500 pg decontaminated50 pg decontaminated5 pg decontaminated500 fg decontaminated50 fg decontaminatedNTC decontaminated5101520253035404502,5005,0007,50010,00012,50015,000Cycles14500 pg untreated:3450 pg untreated:-45 pg untreated:-5500 fg untreated:-1350 fg untreated:12NTC untreated:1500 pg decontaminated:1650 pg decontaminated:-125 pg decontaminated:-750 fg decontaminated:-9NTC decontaminated:22

周期	500 pg untreated	50 pg untreated	5 pg untreated	500 fg untreated	50 fg untreated	NTC untreated	500 pg decontaminated	50 pg decontaminated	5 pg decontaminated	500 fg decontaminated	50 fg decontaminated	NTC decontaminated
1	-217	-38	-13	-63	-12	-7	-133	13	-10	13	17	21
2	-107	-22	2	-36	-9	-22	-55	14	-11	-3	8	-10
3	-69	-10	-1	-23	-20	-26	-27	10	-1	-12	12	-39
4	-46	-1	2	-12	-20	-14	-13		6	-6	8	-44
5	-29	7	4	3	-7	-4	-4	-2	5	5	4	-63
6	-11	9	6	8	11	1	5	1	-6	9	4	-63
7	6	5	11		12	9	15	2	-4	11	-7	-44
8	12	-3	12	6	-7	13	6	8	11	12	1	-29
9	3	-17	3	14	-4	12	-13	9	14	-5	8	-12
10	-15	-16	-7	14	6	6	-8	-5	9	-4	1	5
11	-22	2	-9	5	2	4	-1	-9	9	7	6	20
12	-21	3	-5	-2	-3	13	-10	3	8	14	5	14
13	-2	-11	-4	2	2	2	-5	-2	-3	14	-2	11
14	34	-4	-5	-13	12	1	16	-12	-7		-9	22
15	89		-3	-16	8	7	60	-3	2	-9	-5	19
16	204	1	-20	-9	-1	3	162	2	-15	-22	-10	25
17	416	20	-31	-9	-10	4	371	11	-33	-24	-17	35
18	764	70	-16	-12	-5	-1	746	57	-26	-14	-17	29
19	1,297	173	1	-22	-7	-6	1,310	154	-16	-1	-22	21
20	2,015	347	15	-21	-25	-10	2,049	344	8	2	-15	13
21	2,886	644	46	-20	-27	-16	2,915	657	51	-8	-1	5
22	3,865	1,115	122	-7	-27	-28	3,879	1,122	127	-7	5	8
23	4,879	1,774	261	10	-33	-32	4,908	1,764	270	4	-2	20
24	5,919	2,597	508	35	-24	-21	5,927	2,576	527	34	-20	26
25	6,951	3,525	921	101	-2	-22	6,892	3,514	960	94	-22	25
26	7,930	4,526	1,520	221	14	-13	7,855	4,505	1,587	209	3	10
27	8,818	5,526	2,301	426	37	-5	8,771	5,495	2,406	434	36	8
28	9,628	6,511	3,242	778	99	2	9,570	6,473	3,357	808	93	11
29	10,380	7,472	4,278	1,337	192	9	10,291	7,422	4,384	1,375	199	5
30	11,037	8,371	5,346	2,101	382	43	10,940	8,306	5,445	2,146	393	6
31	11,646	9,210	6,400	3,047	721	101	11,524	9,096	6,489	3,097	727	4
32	12,184	9,985	7,417	4,132	1,229	182	12,042	9,814	7,496	4,149	1,261	-15
33	12,627	10,694	8,402	5,274	1,980	344	12,482	10,482	8,465	5,254	2,018	-24
34	13,001	11,317	9,291	6,409	2,945	586	12,836	11,075	9,387	6,393	2,961	-6
35	13,334	11,858	10,101	7,498	4,071	944	13,113	11,616	10,200	7,492	4,066	3
36	13,631	12,329	10,847	8,566	5,276	1,444	13,356	12,072	10,902	8,520	5,231	6
37	13,878	12,740	11,522	9,594	6,482	2,088	13,547	12,442	11,541	9,482	6,415	9
38	14,080	13,064	12,091	10,509	7,694	2,871	13,718	12,785	12,097	10,364	7,582	-11
39	14,235	13,341	12,562	11,364	8,880	3,793	13,876	13,064	12,576	11,178	8,696	-27
40	14,347	13,580	12,977	12,111	9,965	4,817	13,979	13,267	12,988	11,905	9,747	-14
41	14,443	13,785	13,329	12,773	10,940	5,848	14,068	13,462	13,290	12,533	10,676	-16
42	14,511	13,954	13,617	13,355	11,827	6,871	14,159	13,620	13,547	13,053	11,496	-35
43	14,542	14,068	13,844	13,839	12,602	7,895	14,224	13,739	13,803	13,469	12,202	-22
44	14,597	14,195	14,033	14,276	13,309	8,871	14,280	13,851	14,022	13,814	12,798
45	14,664	14,332	14,217	14,689	14,022	9,824	14,347	13,952	14,234	14,147	13,385	13

圖2：未處理和去污染的qPCR 2x主混合物用于分析具有5個步驟的大腸桿菌gDNA 10倍系列稀釋。包括NTC樣品，并且連續稀釋的所有圖顯示平均三次重復。

使用PCR去污試劑盒進行治療不會降低PCR的靈敏度。即使稀釋DNA，Cq水平也沒有顯著改變（圖2）。

套件內容

DTT（滅活援助）
dsDNase（100個反應）

儲存條件：儲存在-20?C。
樣品材料：該試劑盒可用于減少普通PCR和基于探針的qPCR混合物中的污染DNA。對于一些基于SYBR的qPCR混合物也是有效的。
質量控制：測試試劑盒中是否存在RNase。

出版物

使用二元脫氧核糖核酸酶傳感器多重檢測廣泛耐藥結核病。
Bengtson，HN; Homolka，S。; Niemann，S。; Reis，AJ; 達席爾瓦，PE; Gerasimova，YV; Kolpashchikov，DM; Rohde，KH（2017）
Biosens Bioelectron 2017,94,176-183。

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