Gene Bridges擁有Red / ET重組的專有權(quán)利，并被允許頒發(fā)該技術(shù)的許可證并提供重組服務(wù)。任何其他學術(shù)或商業(yè)組織均無權(quán)提供重組服務(wù)。

與Red / ET重組可在任何選定位置克隆，亞克隆和修飾DNA。它可以改造任何大小的DNA分子，包括很大的分子，例如BAC或大腸桿菌染色體。

Red / ET重組增加了CRISPR / Cas9擴展基因組研究的能力。作為歐盟資助的項目AgedBrainSYSBIO的一部分，我們開發(fā)了一種新的策略來使大型基因組區(qū)域人性化。通過將CRISPR / Cas9與Red / ET重組相結(jié)合，我們成功地將一個33 kb的人類片段敲入了小鼠ApoE基因座。閱讀我們  近發(fā)布的作品  以獲取更多詳細信息。

4路重組（4WR）提供了一種新的快速且簡化的方法，可在單個體內(nèi)重組步驟中從多達四個DNA片段（例如PCR產(chǎn)物）組裝質(zhì)粒。4WR是Gene Bridges廣受歡迎的直接克隆型大腸桿菌菌株GB05-dir（目錄號K008）的新應用。

上海起發(fā)現(xiàn)貨genebridges K003說明書

BAC Subcloning Kit

BAC亞克隆試劑盒

特征

• 無需限制位點

• 多可克隆20 kb的片段

• 高紅色/ ET效率

• 重組后可方便地去除Red / ET重組蛋白表達質(zhì)粒pRedET。

應用

• 將堿基對從BAC的DNA片段亞克隆到高拷貝質(zhì)粒主鏈中

描述

可以包含大插入片段的大腸桿菌載體，例如細菌人工染色體（BAC），為功能基因組學提供了多個優(yōu)勢。它們可以攜帶足夠的DNA，在單個分子中包含大多數(shù)真核基因，包括所有順式作用調(diào)控元件，以及許多真核基因簇，原核調(diào)節(jié)子和許多完整的病毒基因組。然而，常規(guī)的克隆方法依賴于限制酶的使用和體外純化步驟，這排除了大分子的工程改造。因此，直到近，這種分子的用途才受到限制。

BAC亞克隆試劑盒旨在通過Red / ET重組從任何類型的細菌人工染色體（BAC）有效地將高達20 kb的大DNA片段亞克隆到質(zhì)粒載體中。

Red / ET重組（重組）是一種允許對任何大小的DNA分子進行工程改造的方法，包括非常大的分子，例如BAC或大腸桿菌染色體。它依賴于在體內(nèi)同源重組的大腸桿菌，并允許范圍廣泛的具有DNA分子修飾在任何選定的位置上。

內(nèi)容

• Red / ET重組蛋白表達質(zhì)粒pRed / ET，通過此質(zhì)粒轉(zhuǎn)化，可將任何大腸桿菌菌株制成Red / ET精通

• 帶有ColE1復制起點和氨芐青霉素抗性基因的線性載體將用于亞克隆實驗

• 陽性對照，可將來自對照BAC的15 kb片段亞克隆到試劑盒隨附的載體中

• 詳細的協(xié)議，質(zhì)粒，圖譜和序列的描述

序列

ColE1小向量

放大器^R ColE1 ORI

GCTCTCCTGAGTAGGACAAATCCGCCGGGAGCGGATTTGAACGTTGCGAAGCAAC GGCCCGGAGGGTGGCGGGCAGGACGCCCGCCATAAACTGCCAGGCATCAAATTAA GCAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTGCGTTTCTACAAACTCTTTTGTTT ATTTTTCTAATACATCAGAGAGATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGATAATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCG CCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAAC GCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATC GAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTT TTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTGT TGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTG GTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAG AATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCT GACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGAT CATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACG ACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATT AACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAG GCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTA TTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACT GGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAGGCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTA AGCATTGGTAACTGTCAGACCAAGTTTACTCATATATACTTTAGATTGATTTACG CGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGAC CGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTT CTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAG GGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTTGGGTGA TGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTG GAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTTGAACAACACTCAACC CTATCTCGGGCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTG GTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTA ACGTTTACAATTTAAAAGGATCTAGGTGAAGATCCTTTTTGATAATCTCATGACC AAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGA TCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAAC AAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACT CTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTC TAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATA CCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGT CTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCT GAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACT GAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAG GCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGC TTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTG ACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAAC GCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACA TGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGA GTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGC GAGGAAGCGGAAGAGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTA TTTCACACCGCATAGGGTCATGGCTGCGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGAC GCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGT