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        上海起發(fā)現(xiàn)貨HTI凝血酶說明書

        更新時(shí)間:2020-03-11      點(diǎn)擊次數(shù):1826

        Haematologic Technologies制造高質(zhì)量,血漿來源的凝血蛋白,抗體,因子缺陷型血漿和血液收集管,用于體外研究使用。我們確保產(chǎn)品制造流程確保質(zhì)量控制嚴(yán)格,努力成為領(lǐng)頭凝血產(chǎn)品制造商。

        上海起發(fā)現(xiàn)貨HTI凝血酶說明書

        Thrombin (alpha)

        凝血酶(alpha)

        凝血酶原
        蛋白水解激活絲氨酸蛋白酶α-凝血酶是通過酶原,凝血酶原的蛋白水解激活而產(chǎn)生的。酶復(fù)合物凝血酶原酶催化凝血酶原中兩個(gè)肽鍵的蛋白水解,從而產(chǎn)生一個(gè)NH2末端衍生的F1.2區(qū)和異二聚體α-凝血酶。α-凝血酶由“ A”鏈(Mr = 6000)組成,該鏈通過單個(gè)二硫鍵與“ B”鏈(Mr = 31,000)共價(jià)連接。

        •  HCT-0020 人α-凝血酶
        • 尺碼

          100 µg,1 mg,10 mg(1 mg小瓶)
          公式50%甘油/水(v / v)
          存儲(chǔ)-20°攝氏度
          純度通過SDS-PAGE,> 95%
          活性測(cè)定纖維蛋白原凝結(jié)或生色測(cè)定
          保質(zhì)期(正確存放)12個(gè)月
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        • HCT-DFP 人類α-凝血酶,DFP活動(dòng)站點(diǎn)被封鎖
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        • 尺寸100微克
          公式20 mM Hepes,150 mM NaCl,pH 7.4
          存儲(chǔ)-80°攝氏度
          純度通過SDS-PAGE,> 95%
          活性測(cè)定纖維蛋白原凝結(jié)或生色測(cè)定
          保質(zhì)期(正確存放)12個(gè)月
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        • HCT-FPRCK 人類α-凝血酶,PPACK(FPRck)有效部位被封鎖
        • 尺寸100微克
          公式20 mM Hepes,150 mM NaCl,pH 7.4
          存儲(chǔ)-80°攝氏度
          純度通過SDS-PAGE,> 95%
          活性測(cè)定纖維蛋白原凝結(jié)或生色測(cè)定
          保質(zhì)期(正確存放)12個(gè)月
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        • HCT-BFPRCK 人類α-凝血酶,生物素化的PPACK(FPRck)活性位點(diǎn)被封鎖
        • 尺寸100微克
          公式20 mM Hepes,150 mM NaCl,pH 7.4
          存儲(chǔ)-80°攝氏度
          純度通過SDS-PAGE,> 95%
          活性測(cè)定纖維蛋白原凝結(jié)或生色測(cè)定
          保質(zhì)期(正確存放)12個(gè)月
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        • BCT-1020 牛α-凝血酶
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          尺碼200微克,1毫克
          公式50%甘油/水(v / v)
          存儲(chǔ)-20°攝氏度
          純度通過SDS-PAGE,> 95%
          活性測(cè)定纖維蛋白原凝結(jié)或生色測(cè)定
          保質(zhì)期(正確存放)12個(gè)月
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        • BCT-DFP 牛α-凝血酶,DFP活動(dòng)站點(diǎn)被阻止
        • 尺寸200微克
          公式20 mM Hepes,150 mM NaCl,pH 7.4
          存儲(chǔ)-80°攝氏度
          純度通過SDS-PAGE,> 95%
          活性測(cè)定纖維蛋白原凝結(jié)或生色測(cè)定
          保質(zhì)期(正確存放)12個(gè)月
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        • BCT-FPRCK 牛α-凝血酶,PPACK(FPRck)有效部位受阻
          尺寸200微克
          公式20 mM Hepes,150 mM NaCl,pH 7.4
          存儲(chǔ)-80°攝氏度
          純度通過SDS-PAGE,> 95%
          活性測(cè)定纖維蛋白原凝結(jié)或生色測(cè)定
          保質(zhì)期(正確存放)12個(gè)月
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        • BCT-BFPRCK 牛α-凝血酶,生物素化的PPACK(FPRck)活性位點(diǎn)被封鎖
          尺寸200微克
          公式20 mM Hepes,150 mM NaCl,pH 7.4
          存儲(chǔ)-80°攝氏度
          純度通過SDS-PAGE,> 95%
          活性測(cè)定纖維蛋白原凝結(jié)或生色測(cè)定
          保質(zhì)期(正確存放)12個(gè)月
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        • MCT-5020 鼠標(biāo)alpha-凝血酶
        • 尺寸50微克
          公式50%甘油/水(v / v)
          存儲(chǔ)-20°攝氏度
          純度通過SDS-PAGE,> 95%
          活性測(cè)定纖維蛋白原凝結(jié)或生色測(cè)定
          保質(zhì)期(正確存放)12個(gè)月
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        α-凝血酶是通過酶原凝血酶原的蛋白水解激活而產(chǎn)生的高度特異性的絲氨酸蛋白酶(1)。在凝結(jié)過程中,凝血酶裂解纖維蛋白原形成纖維蛋白,導(dǎo)致凝結(jié)的終步驟,即形成纖維蛋白凝塊。凝血酶還負(fù)責(zé)前因子V和VIII因子的反饋激活。還已經(jīng)報(bào)道凝血酶激活因子XIII和血小板,并且還起血管收縮蛋白的作用。凝血酶的促凝血活性通過兩種方式被阻止:1)被肝素輔因子II或抗凝血酶III /肝素復(fù)合物抑制。或2)與血栓調(diào)節(jié)蛋白形成復(fù)合物。凝血酶/血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物的形成導(dǎo)致凝血酶無法裂解纖維蛋白原并激活因子V和VIII,

        凝血酶是由NH 2末端“ A”鏈(Mr = 6,000)和COOH末端“ B”鏈(Mr = 31,000)組成的兩條鏈酶,它們通過單個(gè)二硫鍵共價(jià)結(jié)合。人凝血酶比牛凝血酶短13個(gè)氨基酸,這是由于人蛋白上的凝血酶裂解位點(diǎn)不存在于牛蛋白中。

        凝血酶還用于細(xì)菌中表達(dá)的融合蛋白的位點(diǎn)特異性切割(9-11)。凝血酶敏感位點(diǎn)被摻入目的重組蛋白和促進(jìn)純化和/或表達(dá)的肽或蛋白之間。通過用凝血酶裂解從表達(dá)的中釋放靶蛋白。然后可以通過親和層析容易地除去凝血酶。

        人,牛和小鼠的凝血酶是按照Nesheim等人的描述,使用Lundblad程序(1)的改進(jìn)方法,從純化的凝血酶原中制備的。(2)。凝血酶以50%(體積/體積)甘油/水的形式提供,應(yīng)儲(chǔ)存在-20oC下。通過SDS-PAGE分析確定純度,并在凝血酶特異性凝血測(cè)定中測(cè)量活性,并與標(biāo)準(zhǔn)NIH凝血酶進(jìn)行比較。凝血酶也可通過DFP,F(xiàn)PRck或生物素化FPRck阻斷活性位點(diǎn)。

        融合蛋白的裂解
        除了其在凝血研究中的廣泛應(yīng)用,凝血酶還可用于融合蛋白的位點(diǎn)特異性裂解。凝血酶敏感位點(diǎn)被摻入目的重組蛋白和促進(jìn)純化和/或表達(dá)的肽或蛋白之間。通過用凝血酶裂解從表達(dá)的釋放靶蛋白。然后可以通過親和層析容易地除去凝血酶。批次間的一致性確保每次都能獲得可重復(fù)的結(jié)果。對(duì)于涉及細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn),請(qǐng)與我們聯(lián)系以討論用于細(xì)胞培養(yǎng)的定制低內(nèi)毒素批次。

        凝膠Novex 4-12%Bis-Tris
        加載人β和γ凝血酶,每泳道1 µg
        緩沖MES
        標(biāo)準(zhǔn)參見BluePlus 2; 肌球蛋白(188 kDa),磷酸化酶B(98 kDa),BSA(62 kDa),谷氨酸脫氫酶(49 kDa),酒精脫氫酶(38 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(17 kDa),溶菌酶(14 kDa),抑肽酶(6 kDa),胰島素,B鏈(3 kDa)。

         

         

        本土化等離子體
        行動(dòng)方式絲氨酸蛋白酶切割纖維蛋白原形成纖維蛋白;還負(fù)責(zé)蛋白C的活化,血小板的活化以及前因子,因子V和VIII的反饋激活
        分子重量36,700(3-6)
        消光系數(shù)
        Ë
        1%
        1厘米,280海里
        = 18.3(人類)(6)
        = 19.5(牛)(7)
        具體活動(dòng)約3800 NIH單位/毫克
        等電點(diǎn)7.0-7.6(人類)(3)
        結(jié)構(gòu)體兩個(gè)子單位,大約Mr = 6,000和31,000
        碳水化合物百分比約5%

         

        1. Lundblad,RL等,Methods Enzymol。,45,156(1976)。
        2. Nesheim,ME,等人,J.Biol.Chem。,1987。Chem.258,5386(1983)。
        3. Fenton,JW等人,在《凝血酶的化學(xué)和生物學(xué)》(Editor and Biology of Thrombin)編輯。RL Lundblad,JW Fenton,KG曼恩,第43-70頁。密歇根州安阿伯市:安阿伯科學(xué)出版社,1977年。
        4. Braughman,DJ,et al。,J.Biol.Chem。Chem。,242,5252(1967)。
        5. Winzor,DJ等,Arch。生化。Biophys。,104,202(1964)。
        6. Fenton,JW,et al。,J.Biol.Chem.Soc。,(1992),第3期。Chem。,252,3587(1977)。
        7. Winzor,DJ等,J.Phys。Chem.68,338(1964)。
        8. Magnusson,S。,在The Enzymes,編輯。PD博耶,卷。III,第277-321頁。紐約:學(xué)術(shù)出版社,1971年。
        9. KL的Gaun和JE的Dixon的肛門。Biochem。,192,262(1991)。
        10. Germino,J.和Bastia,D.,過程。Natl。學(xué)院 科學(xué) 美國(guó),81,4692(1984)。
        11. 張建元 生物化學(xué)雜志,151,217(1985)。

         

         

         

         

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