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abbexa abx513030說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間：2020-06-30 點(diǎn)擊次數(shù)：1518

abbexa abx513030說(shuō)明書(shū)

1,25-Dihydroxyvitamin D3 (Calcitriol) ELISA Kit

Catalogue No: abx513030

Price: £395.00

Available Options

* Size: 96 tests

Calcitriol ELISA Kit is an ELISA kit against Calcitriol

骨化三醇ELISA試劑盒是針對(duì)骨化三醇的ELISA試劑盒。

目標(biāo)	1,25-二羥基維生素D3（骨化三醇）
反應(yīng)性	一般（所有物種）
經(jīng)過(guò)測(cè)試的應(yīng)用	ELISA法
建議稀釋	宜稀釋/濃度應(yīng)由終用戶(hù)確定。
存儲(chǔ)	出廠時(shí)溫度為4°C。收到后，請(qǐng)按照試劑盒手冊(cè)中的存放說(shuō)明存放試劑盒。
有效期	該套件的有效期為6個(gè)月。
穩(wěn)定性	試劑盒的穩(wěn)定性取決于活性喪失的速率。在適當(dāng)?shù)拇鎯?chǔ)條件下，有效期內(nèi)的丟失率小于5％。為了大程度地降低性能波動(dòng)，應(yīng)嚴(yán)格控制操作程序和實(shí)驗(yàn)室條件。還強(qiáng)烈建議整個(gè)測(cè)試始終由同一用戶(hù)執(zhí)行。
測(cè)試范圍	15.6 pg / ml-1000 pg / ml
靈敏度	<3.6皮克/毫升
標(biāo)準(zhǔn)格式	凍干
ELISA檢測(cè)	比色法
ELISA數(shù)據(jù)	定量的
樣品類(lèi)型	血清，血漿和其他生物液體。
測(cè)定原理	該試劑盒基于三明治酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)。將抗體預(yù)包被到96孔板上。將標(biāo)準(zhǔn)品，測(cè)試樣品和生物素偶聯(lián)試劑添加到孔中并孵育。然后加入結(jié)合了HRP的試劑，并孵育整個(gè)平板。在每個(gè)階段使用洗滌緩沖液去除未結(jié)合的結(jié)合物。TMB底物用于定量HRP酶促反應(yīng)。添加TMB底物后，只有含有足夠量的骨化三醇的孔才會(huì)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，然后在加入酸性終止溶液后變?yōu)辄S色。黃色的強(qiáng)度與結(jié)合在板上的骨化三醇的量成比例。在酶標(biāo)儀中于450 nm處用分光光度法測(cè)量光密度（OD），由此可計(jì)算出骨化三醇的濃度。
套件組件	預(yù)涂96孔微孔板標(biāo)準(zhǔn) 標(biāo)準(zhǔn)稀釋液洗滌緩沖液檢測(cè)試劑A 檢測(cè)試劑B 稀釋劑A 稀釋劑B TMB基板停止解決方案封口機(jī)
必需但未提供的材料	37°C恒溫箱多通道和單通道移液器以及無(wú)菌移液器吸頭噴瓶或自動(dòng)微孔板清洗機(jī) 1.5毫升管蒸餾水吸收性濾紙 100毫升和1升刻度量筒酶標(biāo)儀（波長(zhǎng)：450 nm） ELISA搖床
試劑準(zhǔn)備	1）標(biāo)準(zhǔn)液：用推薦體積的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液配制標(biāo)準(zhǔn)液，制成標(biāo)準(zhǔn)溶液。然后，按照協(xié)議中的說(shuō)明，使用標(biāo)準(zhǔn)稀釋劑緩沖液對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行系列稀釋。 2）洗滌緩沖液：按照協(xié)議中的說(shuō)明，用蒸餾水稀釋濃縮的洗滌緩沖液。 3）檢測(cè)試劑制備：計(jì)算所需工作溶液的總體積。用稀釋劑A和稀釋劑B分別以1：100稀釋檢測(cè)試劑A和檢測(cè)試劑B。
測(cè)定步驟	1）設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品，測(cè)試樣品和對(duì)照孔。 2）將100μl稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液分裝到標(biāo)準(zhǔn)孔中。 3）將100μl標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液等分到對(duì)照（零）孔中。 4）將100μl稀釋樣品等分到樣品孔中。在37°C下孵育1小時(shí)。 5）將100μl檢測(cè)試劑A分裝到每個(gè)孔中。在37°C下孵育1小時(shí)。 6）洗3次。 7）將100μl檢測(cè)試劑B分裝到每個(gè)孔中。在37°C下孵育30分鐘。 8）洗5次。 9）將90μlTMB底物等分到每個(gè)孔中。在37°C下孵育10-20分鐘。 10）分裝50μl終止溶液。 11）在450 nm下測(cè)量OD。
協(xié)議	使用前，將試劑盒的組分和樣品平衡至室溫（18-25°C）。建議為每個(gè)測(cè)試?yán)L制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。 1.在預(yù)涂板上分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)孔，測(cè)試樣品孔和對(duì)照孔（零孔），然后記錄其位置。建議測(cè)量每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品至少一式兩份。 2.將100 µL的每種標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)照品和樣品加入適當(dāng)?shù)目字小Ｓ蒙w密封板并在37°C下孵育1小時(shí)。 3.取下蓋子并丟棄液體。 4.向每個(gè)孔中添加100μl檢測(cè)試劑A工作溶液。用蓋密封板并在37°C下孵育1小時(shí)。 5.取下蓋子并丟棄溶液。用1X Wash Buffer清洗板3次。 6.將100 µL檢測(cè)試劑B工作溶液添加到每個(gè)孔中，密封并在37°C孵育30分鐘。 7.棄去溶液并按照上一步中的說(shuō)明用洗滌緩沖液將板洗滌5次。 8.將90μlTMB底物等分到每個(gè)孔中。用蓋密封板并在37°C下孵育10-20分鐘。避免暴露在光線(xiàn)下。孵育時(shí)間僅供參考，宜時(shí)間應(yīng)由終用戶(hù)確定。請(qǐng)勿超過(guò)30分鐘。 9.向每個(gè)孔中加入50 µL終止溶液。立即在450 nm處讀取。
結(jié)果計(jì)算	為了進(jìn)行計(jì)算，請(qǐng)對(duì)每個(gè)參考標(biāo)準(zhǔn)品和每個(gè)樣品的OD450重復(fù)讀數(shù)取平均值，然后減去平均對(duì)照（零）OD450讀數(shù)。可以將標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制為每種參考標(biāo)準(zhǔn)溶液（Y）的相對(duì)OD450與每種標(biāo)準(zhǔn)溶液（X）的各自濃度的關(guān)系。樣品的骨化三醇濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)內(nèi)插。
可用性	在5-12個(gè)工作日內(nèi)發(fā)貨。
注意	本產(chǎn)品僅供研究使用。范圍和靈敏度可能會(huì)發(fā)生變化。請(qǐng)與我們聯(lián)系以獲取新的產(chǎn)品信息。為了獲得準(zhǔn)確的結(jié)果，必須將樣品濃度稀釋到試劑盒的中間范圍。請(qǐng)注意，我們的ELISA和CLIA試劑盒針對(duì)檢測(cè)天然樣品（而非重組蛋白）進(jìn)行了優(yōu)化。我們無(wú)法保證檢測(cè)到重組蛋白，因?yàn)樗鼈兣c天然蛋白可能具有不同的序列或三級(jí)結(jié)構(gòu)。

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