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        重組豬源RNase抑制劑說明書

        更新時間:2023-04-21      點擊次數:1447

        重組豬源RNase抑制劑說明書

        上海起發生物科技有限公司(Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.)屬于上海起發實驗試劑有限公司(2009年成立)旗下的子公司,成立的初衷是建立上海起發生物自有品牌,打造優質的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時,把好生物產業鏈中的國產生物試劑品質關。未來讓每一個和我們一樣擁有民族情懷的企業,共同創世界優秀的中國生物制造企業,圓夢中國。

        產品詳情

        貨號

        規格

        價格

        78BAB10003-100uL

        100uL(4KU)

        200.00

        78BAB10003-1ml

        1ml (40KU)

        1600.00

        78BAB10003-50ml

        50ml (2MU)

        50000.00

        產品描述

        本產品是以大腸桿菌中進行表達,并通過親和層析純化的重組豬源RNase抑制劑,該蛋白特征與豬肝和人胎盤來源此類酶相似,可替代天然提取 RNase Inhibitor的應用。本產品與RNase A形成1: 1復合體,抑制RNase活性。該反應是可逆的,通過尿素及巰基類試劑能夠解離復合體,使RNase復性而抑制劑不可逆失活。本產品與其它競爭性抑制劑(核酸類,無機磷酸類)不同,可以很容易地通過苯酚處理將其從反應體系中除去,但不能抑制逆轉錄酶的RNase H的活性。使用時可直接加入含有RNA的反應液中用于cDNA第一鏈合成、體外轉錄和體外翻譯等實驗。

        產品特點

        ·     cDNA合成

        ·      體外轉錄

        ·      體外翻譯

        ·      1-Step RT-qPCR

        產品組分

        緩沖液成分:20 mM HEPES-KOH(pH 7.6),50mM KCl,8mM DTT,50% (v/v) glycerol。

        使用方法

        使用方法

        溫馨提示:需要用無RNA酶的PCR管中配制RNA/引物預混液

        1 cDNA合成

        (1)在無RNA酶的PCR管中配制RNA/引物預混液

        組分

        反應體積(10ul)

        Oligo(dT)20

        (或Random primer)

        (或基因特異引物)

        25pmoles

        (25pmoles)

        (5pmoles)

        10mM dNTPs

        2µL

        模板RNA

        2pg-5µg

        DNase/Rnase Free Water

        10ul

        2)65℃加熱5min,立即置于冰上

        組分

        反應體積(10ul)

        RNA引物預混液

        10ul

        5x RT Buffer

        4µL

        BIOHUB Reverse Transcritase

        1ul

        RNase inhibitor(40U/µL)

        1ul

        100mM DTT

        2ul

        DNase/Rnase Free Water

        補足20ul

        3)輕輕混勻,按如下反應條件設置

        逆轉錄反應條件

        1

        42℃

        20-60min

        2

        99℃

        5min

        備注:逆轉錄溫度可在42-60之間調整,反應時間建議在20-60min內調整

         

        4)得到的cDNA溶液可以直接用于第二鏈cDNA合成及后續PCR反應。

        優化參考方法

        優化參數

        參考范圍

        逆轉錄

        50-60℃ 5-15min

        預變性溫度時間

        95-98℃ 10sec-5min

        變性溫度

        95-98℃ 3sec-10sec

        延伸/退火溫度

        60-65℃ 5sec-30sec

        注意事項

        1. 本產品在PH7?8時表現最佳抑制RNase活性。

        2. 本產品發揮活性作用至少添加1 mM的DTT。

        3. 本產品不抑制RNase H活性及逆轉錄酶活性。

        運輸及保存方法

        -20℃可保存12個月。



        上海起發實驗試劑有限公司
        地址:上海浦東川沙鎮川沙路6619號上海起發實驗試劑有限公司
        郵箱:xs1@78bio.com
        傳真:021-50724961
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