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        bio-rad電轉(zhuǎn)杯選購(gòu)指南

        更新時(shí)間:2023-08-21      點(diǎn)擊次數(shù):3682

        bio-rad電轉(zhuǎn)杯選購(gòu)指南

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        Bio-Rad 高品質(zhì)的電轉(zhuǎn)杯為您寶貴的樣品提供穩(wěn)定的脈沖傳送,確保結(jié)果的重復(fù)性。電擊杯有3 種不同的電極間距 — 0.4、0.2 和0.1cm,針對(duì)不同的細(xì)胞類型選擇理想的場(chǎng)強(qiáng)。電轉(zhuǎn)杯的特點(diǎn)包括:

        *       保證效率— 使用這些電轉(zhuǎn)杯確保最高電轉(zhuǎn)化效率,制作精良的電擊間距公差保證了實(shí)驗(yàn)間的重復(fù)性
        *       確保無(wú)菌— 每一個(gè)電轉(zhuǎn)杯都在凈室環(huán)境下裝配、洗滌、加蓋和包裝,并經(jīng)過(guò)gamma 射線滅菌
        *       結(jié)構(gòu)堅(jiān)固— 耐用的聚碳酸酯能承受ji高的電壓
        *       標(biāo)有顏色的蓋和包裝袋— 可快速地區(qū)分不同規(guī)格的電擊杯
        *       一致的腔體形狀— 無(wú)縫塑料模制避免了滲漏并保證鋁板平行— 這是均一的樣品處理和安全性的關(guān)鍵所在

        *       平滑的電極表面— 鋁片經(jīng)過(guò)11步嚴(yán)格的蝕刻和清洗處理,確保對(duì)整個(gè)樣品的一致性脈沖傳送


        0.1 cm電轉(zhuǎn)杯使用說(shuō)明

        1. 將0.1 cm電轉(zhuǎn)杯和杯蓋從儲(chǔ)存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘,待其瀝干水分,正置5分鐘,待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中,壓實(shí)冰面,電極杯頂離冰面0.5 cm以方便蓋上杯蓋,冰中靜置5分鐘充分降溫。

        2. 取-80℃保存的電擊感受態(tài)細(xì)胞插入冰中5 分鐘,待其融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并用手拍打EP管底輕輕混勻,避免產(chǎn)生氣泡,立即插入冰中。

        3. 用200 μl槍頭(用刀切除0.5cm槍尖)將感受態(tài)-DNA混合物快速移到電轉(zhuǎn)杯中,避免產(chǎn)生氣泡,蓋上杯蓋。

        4. 啟動(dòng)電轉(zhuǎn)儀,設(shè)置參數(shù):C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此為BioRad 電轉(zhuǎn)儀推薦參數(shù),也可按所用電轉(zhuǎn)儀推薦的參數(shù)操作),將電轉(zhuǎn)杯快速放入電轉(zhuǎn)槽中,電擊完成快速插入冰中。

        5. 2分鐘后從冰中取出電轉(zhuǎn)杯,放室溫,加入不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基(室溫),吹吸電轉(zhuǎn)杯底部數(shù)次混勻后,轉(zhuǎn)移到無(wú)菌的離心管中,根據(jù)不同菌種的復(fù)蘇條件進(jìn)行復(fù)蘇及后續(xù)實(shí)驗(yàn)。


        注意事項(xiàng)

        1.電轉(zhuǎn)杯的保存條件:

        新的原裝電擊杯可在室溫保存,使用過(guò)的電轉(zhuǎn)杯放純乙醇中保存。

        2. 使用注意事項(xiàng):

        A,電轉(zhuǎn)杯重復(fù)使用,內(nèi)腔體容易吸附細(xì)胞膜碎片,造成電壓不穩(wěn),轉(zhuǎn)化效率降低。

        B,盡量使用新的電轉(zhuǎn)杯,在電轉(zhuǎn)杯內(nèi)腔產(chǎn)生污垢后及時(shí)清洗或丟棄,不可多次重復(fù)使用。

        C,每次用完電轉(zhuǎn)杯清洗時(shí),應(yīng)大力沖洗。

        D,使用前,從乙醇中取出電轉(zhuǎn)杯應(yīng)放吸水紙去除乙醇后方可使用。



        電擊杯選購(gòu)指南

         

        0.4 cm 間距電轉(zhuǎn)杯
        寬間距、低場(chǎng)強(qiáng)、應(yīng)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞和其它真核細(xì)胞
        0.2 cm 間距電轉(zhuǎn)杯
        窄間距、高場(chǎng)強(qiáng)、應(yīng)用于酵母、細(xì)菌和其它真核細(xì)胞
        0.1 cm 間距電轉(zhuǎn)杯
        最窄間距、ji高的場(chǎng)強(qiáng),淺底用于小體積樣品(40–80 µl)應(yīng)用于酵母和細(xì)菌轉(zhuǎn)化

         



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