防止RNA的降解

對(duì)于RNA的抽提質(zhì)量影響至關(guān)重要的幾個(gè)因素之一，是在RNA抽提之前如何處理樣本。

這里我們可以看到一個(gè)小鼠肝組織樣本在室溫下分別放置2小時(shí)，4小時(shí)，過(guò)夜之后提取的RNA電泳圖。RNA在未處理的樣本中很快就降解了。

你知道嗎？

內(nèi)源RNase量在不同種類組織中差異極大。腦組織和心組織擁有相對(duì)zui低的內(nèi)源RNase，胸腺組織和胰腺組織擁有比腦組織多100,000倍內(nèi)源RNase。

當(dāng)你著手樣本破裂均漿時(shí)，請(qǐng)將以上因素考慮進(jìn)去，能在獲得樣本的zui初時(shí)間將富含RNase的樣本放入RNAlater保存液，以便保存更少降解的樣本用于后繼破裂均漿。

保護(hù)樣本免于RNase困擾

RNAlater是一種液態(tài)，無(wú)毒的組織儲(chǔ)藏試劑，能夠迅速滲透組織來(lái)穩(wěn)定和保護(hù)細(xì)胞RNA。使用RNAlater您無(wú)需迅速處理組織樣品或液態(tài)凍結(jié)樣品以備后繼處理。組織切割后浸沒(méi)入RNAlater中儲(chǔ)藏，不會(huì)損害后繼RNA分步驟所獲得的RNA質(zhì)量和數(shù)量。

只需要方便地將樣品（組織、細(xì)胞、土壤、昆蟲、植物等等）侵入5-10倍體積的RNAlater也中保存，就可保護(hù)樣品內(nèi)RNA免于內(nèi)源RNAlater降解。大多數(shù)組織經(jīng)RNAlater處理后可以在室溫或低溫保存很長(zhǎng)時(shí)間，在-20°C/-80°C甚至無(wú)限長(zhǎng)。

提示

RNAlater是一種非特異的蛋白變性劑。在它的作用下不僅RNase被變性抑制從而保護(hù)RNA，Dnase/核酸聚合酶/大多數(shù)蛋白酶同時(shí)被變性抑制，因而同樣可以保護(hù)樣本中的DNA、表達(dá)譜和蛋白質(zhì)完整性。