巨噬細胞去除實驗

 去除巨噬細胞是研究巨噬細胞功能的重要方法。巨噬細胞可吞噬clodronate Liposome，在溶酶體的作用下，clodronate可釋放出來，當其達到一定濃度時，可引起巨噬細胞的凋亡，從而去除巨噬細胞。clodronate Liposome可局部注射去除注射部位臨近的巨噬細胞，如肺、膝關節、腫瘤局部和腦等；也可尾靜脈或腹腔注射去除循環途徑中的單核巨噬細胞，如肝臟和脾臟中的巨噬細胞。

1.       脂質體的準備

美國的FormuMax Scientific可以提供多種clodronate Liposome 具體產品可以上http://www.liposomeexpert.com查詢，他們中國代理商是上海起福生物科技有限公司

www.avtt3.cc  4006551678

2.       脂質體的體內注射

隔日尾靜脈注射200ul clodronate liposome，根據實驗要求制定注射日程。通過免疫組化或流式檢測巨噬細胞的去除效率。

尾靜脈注射方法：

1.       將小鼠放在倒扣的飯盒內，從孔口拉出尾巴，小鼠的尾部有2條動脈和3條靜脈，2條動脈分別在尾部的背側面和腹側面，3條靜脈呈品字型分布,一般采用左右兩側的靜脈；

2.       將紗布浸泡于約70度的溫水中，拿出后包裹尾巴，以達到使尾部血管擴張及軟化表皮角質的目的；

3.       行尾部靜脈注射時，以左手拇指和食指前后摁住鼠尾，留出約2cm一段，使皮膚緊張，靜脈更為充盈，右手持1ml針頭注射器，使針頭與靜脈平行（小于30°角），從尾巴的下1/4處進針，開始注入藥物時應緩慢，仔細觀察，如果無阻力，無白色皮丘出現，說明已刺入血管，可正式注入藥物。

有的實驗需連日反復尾靜脈注射給藥，注射部位應盡可能從尾端開始，按次序向尾根部移動，更換血管位置注射給藥。拔出針頭后，用棉球按住注射部位輕壓1-2min，止血。