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        血漿游離血紅蛋白測定

        更新時間:2013-10-25      點擊次數:3863

        實驗原理

          血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態氧,使鄰甲聯苯胺氧化發生顏色變化,由無色zui終變為藍紫色。根據顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量。

        實驗方法

          材料:

          1.2g/L鄰甲聯苯胺溶液

          2.1%H2O2

          3.10%醋酸溶液

          4.分光光度計

          方法:

          1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。

          2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調零,測定測定管的吸光度。

        試劑 (ml)

        測定管

        空白管

        2 g/L鄰甲聯苯胺溶液

        0.5

        0.5

        患者血漿

        0.02

        /

        1% H2O2

        0.5

        0.5

        混勻后室溫放置10min

        10%醋酸溶液

        5.0

        5.0

        室溫放置10min

          3.計算公式

          血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100

        實驗結果計算

          參考范圍:0-40mg/L

        注意事項

          1.一切容器避免血紅蛋白污染;

          2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血;

          3.鄰聯苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染;

          4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準確。

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